Avaliação comparativa das técnicas de hibridização in situ fluorescente e variação no número de cópias através de marcadores de prognósticos em pacientes acometidos pela leucemia linfocítica crônica

Título: Avaliação comparativa das técnicas de hibridização in situ fluorescente e variação no número de cópias através de marcadores de prognósticos em pacientes acometidos pela leucemia linfocítica crônica

Aluno: Laís Helena Rescinho Macambira

Local: Videoconferência - Link

Data: 17/08/2020

Horário: 16h

Resumo:

A leucemia linfocítica crônica (LLC) é um câncer hematológico de crescimento lento, caracterizado pela proliferação e acúmulo de linfócitos B monoclonais maduros na medula óssea, no sangue periférico, nos linfonodos e no baço. A LLC possui maior prevalência em pessoas idosas, com média de idade de 64-70 anos, sendo mais frequente em homens. Há uma heterogeneidade clínica na gravidade da patologia, sendo assim existe a necessidade da investigação de parâmetros prognósticos os quais identificariam os pacientes com alto risco de progressão da doença. O objetivo deste estudo é avaliar o número de cópias dos genes TP53, ATM, ENOX, MDM2 e região 13q34 através da técnica de variação de números de copias (Copy Number Variation - CNV) por Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) em tempo real e comparar com o número de cópias obtido pela técnica de Hibridização in situ Fluorescente (FISH) em pacientes com Leucemia Linfocítica Crônica. Os indivíduos com o diagnóstico de LLC atendidos no Hospital Ophir Loyola (HOL) encaminhados ao Laboratório de Biologia Molecular, no período de Janeiro de 2017 a outubro de 2020, foram submetidos a avaliação dos genes pela técnica de FISH para as regiões 11q22, 13q14, 13q34, 17p13 e a CEP 12. Em seguida, foi feita a análise pela técnica de CNV para os genes TP53 (17p13), ATM (11q22), ENOX (13q34), MDM2 (CEP 12) e região 13q34 (sonda não gênica). Investigaram-se 47 pacientes pela análise de FISH, foi detectado 34,04% (16/47) alterações citogenéticas em 15 amostras. Através da técnica de FISH foram diagnosticados 10,6% (5/47) pacientes com deleção no gene Tp53, 4,25% (2/47) com mutação no gene ATM, 8,5% (4/47) del.13q14.3 e 2,54% (2/47) del. 13q34. Verificou-se CNV=1 em 9,30% (4/43) das amostras investigadas para Tp53, CNV=O em 2,32% (1/43) dos pacientes para o gene ENOX, também para ENOX observou CNV=1 em 6,97% (3/43) das amostras, CNV=3 em 34,88% (15/43) das amostras investigadas para MDM2 e CNV=1 em 6,97% (3/43) das amostras avaliadas para 13q34. Obteve-se, 20% (1/5) de concordância para a deleção no gene TP53, entre FISH e q-PCR e a correlação de aproximadamente 67% (2/3) para trissomia do cromossomo 12.

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